Mycologie Médicale
Cours

Genre Cryptococcus

Basidiomycotina

Tremellale

Filobasidiaceae

Description Cryptococcus

  • Levures arrondies 30-60 µm

    capsule muco-polysaccharidique

  • Colonies blanc crème, muqueuses

  • Températures élevées → 39°C

  • Sensible à l'actidione

  • Pas de pseudomycélium

  • Pas de fermentation des sucres

  • Inositol positif

  • Uréase positif, phénoloxydase

La capsule de Cryptococcus
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Remarque : les mutants acapsulés sont avirulents

Bleu lactique et encre de Chine

Echantillons

  • Culot de centrifugation

  • Ecouvillonnage du pus d'une lésion cutanée

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Vue en contraste interférentiel
Vue en contraste interférentiel
Diagnostic de Cryptococcus neoformans
  • Examen direct

    • Prélèvements: LBA, LCR...

    • Recherche de la capsule

    • Cultures sur milieu sans actidione à 37°C: µscopie et aspect macroscopique

  • Recherche d'activité enzymatiques

    • Uréase

    • Phénoloxydase (milieu spécifique)

    • Assimilation des sucres

  • Sérologie

    • Ag capsulaire polysaccharidique circulants

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  • 20-30 espèces

  • Anamorphes

    • Cryptococcus neoformans, C. grubii, C. gattii

  • Téléomorphes

    • Filobasidiella neoformans, F. bacilliformis

  • Affinité: matières uroprotéiques

    • Sol des poulaillers, fientes d'oiseaux (pigeons, perroquets, canaris...)

    • Débris végétaux, bois morts, fruits, lait...

Epidémiologie - Contamination
  • 4 sérotypes différents: A, B, C, D

    • A & D = Filobasidiella neoformans

      air, sol, plantes, animaux, homme

    • B & C = Filobasidiella bacillispora

      isolés à partir de malades en zone tropicale et sub-tropicale

      (Amérique, Afrique, Asie, Australie)

Origine naturelle des sérotypes
Origine naturelle des sérotypes
Répartition des sérotypes non A
Répartition des sérotypes non A[Zoom...]
Réservoir naturel: sol souillé
  • Jabot du pigeon

  • Fientes: survie > 2ans

  • Oiseaux non malades

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Eléments contaminants
  • Spores sexuées

Filobasidiella neoformans
Filobasidiella neoformans
  • Filobasidiella bacillispora (MEB colorisé)

    • Paires de levures compatibles

    • Hyphes résultant de la conjugaison

    • Basides

    • Basidiospores (droites ou incurvées)

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Les cryptococcoses

  • Cosmopolites

    • Rares chez le sujet immunocompétent

  • Lésions pulmonaires → point de départ

    • Immunodépression

    • Hémopathies sévères

    • Corticothérapies

  • Lésions neurologiques

    • Méningites subaiguës ou chroniques

  • Localisations cutanées, osseuses, viscérales...

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Clinique Cryptococcose

Porte d'entrée de la basidiospore

  • Pulmonaire:

    • Principale: poussières de l'air

    • Stade latent: dans macrophage alvéolaire

  • Inoculation traumatique: rarement

    • Bois d'essences tropicales: cages canaris... caisses de fruits exotiques...

    • Atteinte primitive localisée: cutanée

  • Localisation pulmonaire:

    nodules, plages fibreuses

  • Symptômes peu spécifiques

  • Souvent bénigne

    • broncho-pneumopathies ± infiltrats

    • toux variées: sèches, grasses, hémoptisie...

    évocateur de tuberculose... de tumeurs...

→ peut passer inaperçu

  • Possible retard au diagnostic

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Cryptococcose pulmonaire

Evolutions possibles

Guérison spontanée:

foyer quiescent minime, calcifié

Persistance et extension

large foyer nécrotique

forme pseudo-tumorale: cryptococcome

Dissémination hématogène

évolution défavorable chez l'immunodéprimé

atteinte poly-viscérale possible

Latence dans les macrophages
Latence dans les macrophages
Notion de terrain

Révélation à l'occasion d'une modification de terrain

  • Immunodépression (VIH)

  • Immunosuppression (transplantation)

  • Chimiothérapies anticancéreuses

  • Corticothérapies à long terme...

Rôle prépondérant de l'immunité cellulaire

  • Lymphocytes T CD4, CD8

    • fongistatiques

    • formation du granulome

    • prévention de la dissémination

Affinité ectodermique

Dissémination sanguine ou lymphatique

Tropisme méningo-encéphalique

  • SNC

  • Peau

  • Os

Cryptococcose généralisée: disséminée, atteinte poly-viscérale

→ levures capsulées présentes dans les prélèvements: LBA, pus, urines, biopsies...

Passage de la BHE
Barrière hémato-encéphalique
Barrière hémato-encéphalique
Localisation cérébrale
  • Leptoméninges

  • Base du crane

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Cryptococcose méningée
  • Prévalence fortement liée à celle du VIH

  • Méningo-encéphalite fébrile, lente...

  • Symptômes non spécifiques liés à l'œdème cérébral

    • Céphalées, vomissements

    • Vision trouble

    • Confusion mentale, agitation

  • Signes neurologiques corticaux: épilepsie

  • Parfois signes neurologiques moteurs

  • Ponction lombaire: LCR

    • Liquide clair

    • Lymphocytaire 100-200 /mm3

    • Hyper-protéinorachie > 2g/L

    • Hypo-glucorachie < 0,5

  • Présence de levures capsulées

  • Dosage des antigènes: plus sensible

Clinique Cryptococcose cutanée
  • Localisation cutanée

    • Papules acnéiformes, lésions ulcérantes

    • Classique au cours d'un SIDA

  • Atteintes des muqueuses

    • Bouche, nez, amygdales

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Cryptococcose cutanée Ia

Manifestations cutanées primaires

  • Antécédents: traumatisme, lésion préexistante

  • Région rurale, activité prédisposant (blessures)

Panaris et phlégmon des fléchisseurs suite à blessure de l'index pas un cageot
Panaris et phlégmon des fléchisseurs suite à blessure de l'index pas un cageot
Cellulite et phlégmon suite à une piqûre d'insecte
Cellulite et phlégmon suite à une piqûre d'insecte
Cryptococcoses animales

Isolées:

  • chat FIV + →

  • chien

  • cheval

  • cobaye

Epidémies:

  • bovins

  • (mastite, lait gris

  • visqueux, mucoïde)

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Diagnostic en laboratoire
  • Examen direct: encre de chine

    • Culot de centrifugation

    • Ecouvillonnage de pus d'une lésion cutanée

  • Histologie: colorations PAS, GG... sur biopsies

  • Cultures: liquides à tester

    • Sérum, Urines

    • LCR: liquide céphalo-rachidien

    • LBA: liquide de lavage broncho-alvéolaire

    • Expectorations

  • Examens indirects:

    • Enzymologie: auxano- et zymo-grammes, uréase

    • Recherche Ag (Ac)

Cryptococcus neoformans dans le cerveau, Observations à l'encre de chine
Cryptococcus neoformans dans le cerveau, Observations à l'encre de chine
Examen direct et histologie
  • Test à l'encre de Chine

  • Coloration histologiques

    • HE, HES

    • Argentique: GG

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Coloration HES - Coloration PAS
Coloration HES - Coloration PAS
Coloration GC
Coloration GC

Spécifiques de la capsule

  • muci-carmin

  • bleu alcian

Cultures
  • Milieu de Sabouraud + antibiotique, 30-35°C

  • Milieux spécifiques: Niger, CGB

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Cryptococcus neoformans

et Candida albicans

distingués en mélange

sur gélose de Niger

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Cryptococcus neoformans

et C. gattii (→ bleu) distingués

sur milieu à la Canavanine/Glycine

et Bleu de bromothymol

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Paroi: interface clé de la réponse immune
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Sérologie

Antigène polyosidique capsulaire

  • Facteur de virulence majeur

  • Sécrété au cours de la croissance in vivo

  • Concentration corrélée à la charge fongique

  • Sensibilité: +++ en cas de SIDA

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CHAMPIGNONS FILAMENTEUX (page suivante)Genre Malassezia (page Précédente)
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