Genre Cryptococcus

• Levures arrondies 30-60 µm

  capsule muco-polysaccharidique

• Colonies blanc crème, muqueuses

• Températures élevées → 39°C

• Sensible à l'actidione

• Pas de pseudomycélium

• Pas de fermentation des sucres

• Inositol positif

• Uréase positif, phénoloxydase

Remarque : les mutants acapsulés sont avirulents

Echantillons

• Culot de centrifugation

• Ecouvillonnage du pus d'une lésion cutanée

Vue en contraste interférentiel

Examen direct Prélèvements: LBA, LCR... Recherche de la capsule Cultures sur milieu sans actidione à 37°C: µscopie et aspect macroscopique Recherche d'activité enzymatiques Uréase Phénoloxydase (milieu spécifique) Assimilation des sucres Sérologie Ag capsulaire polysaccharidique circulants

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• 20-30 espèces

• Anamorphes

  • Cryptococcus neoformans, C. grubii, C. gattii

• Téléomorphes

  • Filobasidiella neoformans, F. bacilliformis

• Affinité: matières uroprotéiques

  • Sol des poulaillers, fientes d'oiseaux (pigeons, perroquets, canaris...)

  • Débris végétaux, bois morts, fruits, lait...

• 4 sérotypes différents: A, B, C, D

  • A & D = Filobasidiella neoformans

    air, sol, plantes, animaux, homme

  • B & C = Filobasidiella bacillispora

    isolés à partir de malades en zone tropicale et sub-tropicale

    (Amérique, Afrique, Asie, Australie)

Origine naturelle des sérotypes

Répartition des sérotypes non A[Zoom...]

• Spores sexuées

Filobasidiella neoformans

Filobasidiella bacillispora (MEB colorisé) Paires de levures compatibles Hyphes résultant de la conjugaison Basides Basidiospores (droites ou incurvées)

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Porte d'entrée de la basidiospore

• Pulmonaire:

  • Principale: poussières de l'air

  • Stade latent: dans macrophage alvéolaire

• Inoculation traumatique: rarement

  • Bois d'essences tropicales: cages canaris... caisses de fruits exotiques...

  • Atteinte primitive localisée: cutanée

Localisation pulmonaire: nodules, plages fibreuses Symptômes peu spécifiques Souvent bénigne broncho-pneumopathies ± infiltrats toux variées: sèches, grasses, hémoptisie... évocateur de tuberculose... de tumeurs... → peut passer inaperçu Possible retard au diagnostic

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Evolutions possibles

Guérison spontanée:

foyer quiescent minime, calcifié

Persistance et extension

large foyer nécrotique

forme pseudo-tumorale: cryptococcome

Dissémination hématogène

évolution défavorable chez l'immunodéprimé

atteinte poly-viscérale possible

Latence dans les macrophages

Révélation à l'occasion d'une modification de terrain

• Immunodépression (VIH)

• Immunosuppression (transplantation)

• Chimiothérapies anticancéreuses

• Corticothérapies à long terme...

Rôle prépondérant de l'immunité cellulaire

• Lymphocytes T CD4, CD8

  • fongistatiques

  • formation du granulome

  • prévention de la dissémination

Dissémination sanguine ou lymphatique

Tropisme méningo-encéphalique

• SNC

• Peau

• Os

Cryptococcose généralisée: disséminée, atteinte poly-viscérale

→ levures capsulées présentes dans les prélèvements: LBA, pus, urines, biopsies...

• Leptoméninges

• Base du crane

• Prévalence fortement liée à celle du VIH

• Méningo-encéphalite fébrile, lente...

• Symptômes non spécifiques liés à l'œdème cérébral

  • Céphalées, vomissements

  • Vision trouble

  • Confusion mentale, agitation

• Signes neurologiques corticaux: épilepsie

• Parfois signes neurologiques moteurs

• Ponction lombaire: LCR

  • Liquide clair

  • Lymphocytaire 100-200 /mm3

  • Hyper-protéinorachie > 2g/L

  • Hypo-glucorachie < 0,5

• Présence de levures capsulées

• Dosage des antigènes: plus sensible

• Localisation cutanée

  • Papules acnéiformes, lésions ulcérantes

  • Classique au cours d'un SIDA

• Atteintes des muqueuses

  • Bouche, nez, amygdales

Manifestations cutanées primaires

• Antécédents: traumatisme, lésion préexistante

• Région rurale, activité prédisposant (blessures)

Panaris et phlégmon des fléchisseurs suite à blessure de l'index pas un cageot

Cellulite et phlégmon suite à une piqûre d'insecte

• Examen direct: encre de chine

  • Culot de centrifugation

  • Ecouvillonnage de pus d'une lésion cutanée

• Histologie: colorations PAS, GG... sur biopsies

• Cultures: liquides à tester

  • Sérum, Urines

  • LCR: liquide céphalo-rachidien

  • LBA: liquide de lavage broncho-alvéolaire

  • Expectorations

• Examens indirects:

  • Enzymologie: auxano- et zymo-grammes, uréase

  • Recherche Ag (Ac)

Cryptococcus neoformans dans le cerveau, Observations à l'encre de chine

• Milieu de Sabouraud + antibiotique, 30-35°C

• Milieux spécifiques: Niger, CGB

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Cryptococcus neoformans et Candida albicans distingués en mélange sur gélose de Niger

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Cryptococcus neoformans et C. gattii (→ bleu) distingués sur milieu à la Canavanine/Glycine et Bleu de bromothymol

Antigène polyosidique capsulaire

• Facteur de virulence majeur

• Sécrété au cours de la croissance in vivo

• Concentration corrélée à la charge fongique

• Sensibilité: +++ en cas de SIDA