Diagnostic virologique et suivi de l'infection par le VIH

Techniques ELISA recherchant des anticorps totaux à partir d'échantillons de sang.

• Trousses commerciales utilisant des mélanges d'anticorps anti-VIH-1 et VIH-2

• Quelques faux positifs (0,5%)

Mise en contact du sérum avec différents antigènes viraux séparés en fonction de leur taille Réponse qualitative et quantitative

Exemple de western blot pour le diagnostic de l'infection par le VIH.[Zoom...]Info1

Critères d'interprétation du western blot dans l'infection par le VIH :

• Western blot positif

  • 2 gp d'enveloppe (gp 160, 120, 41) + une autre bande = wb positif

• Western blot douteux

  • p24 isolée, gp160 seule ...

  • Vérifier 3 semaines plus tard

  • Début séroconversion, VIH-2, non spécifique...

L'antigène p24 est une protéine virale (capside) qui est sécrétée dans le sang au cours de l'infection.

Au cours d'une primo-infection, on peut détecter cette protéine dans le sang grâce à des techniques ELISA.

Ensuite, des anticorps sont synthétisés, notamment des anticorps anti-p24 qui vont se complexer à la protéine p24 : elle ne sera plus détectable par les tests ELISA.

La recherche de l'antigène p24 est donc le marqueur de la primo-infection par le VIH.

C'est une technique de biologie moléculaire basée sur une RT-PCR en temps réel quantitative.

Ne sont autorisées que les techniques commerciales, qui sont de plus en plus automatisées.

Différentes méthodes :

• RT-PCR en temps réel,

• (ADN branché, )

• (NASBA ... )

Les résultats sont donnés en nombre de copies/ml de plasma et en log10 du nombre de copies/ml de plasma

En dehors de la primo-infection, la stratégie de diagnostic d'une infection par le VIH repose sur :

• le dépistage : recherche d'anticorps anti-VIH par ELISA

• si nécessaire, la confirmation de la présence de ces anticorps par western blot

Le dépistage est :

• Volontaire, prescrit par médecin

• Résultats sont confidentiels

Le dépistage de l'infection par le VIH se fait à partir d'un échantillon de sérum sur lequel on recherche des anticorps anti-VIH par 2 techniques ELISA commerciales différentes.

Les résultats possibles sont les suivants :

• Sérum 1 : Recherche d'anticorps par ELISA

  • Recherche négative

  • Recherche douteuse > Sérum 2

  • Recherche positive > Sérum 2

• Sérum 2 : Confirmation par ELISA + western blot

Chez l'enfant né de mère séropositive pour le VIH, on détecte les anticorps maternels pendant 6 mois à 1 an après la naissance. Les tests ELISA ne sont donc pas utilisables pour diagnostiquer la contamination de l'enfant.

Le seul test diagnostic utilisable est donc la quantification de l'ARN viral plasmatique. Cette quantification est réalisée dans les jours qui suivent la naissance puis régulièrement pendant la première année de vie. Si au bout d'1 an, la quantification de l'ARN viral plasmatique reste négative, l'enfant n'a pas été contaminé ...

Une fois que le diagnostic est établi, la décision de traiter le patient doit être prise. Il n'y a pas de critère précis pour tous les patients fixant le début d'un traitement antirétroviral : cette décision doit être adaptée à chaque patient.

Il existe tout de même quelques critères basés sur le nombre de lymphocytes T CD4+.

• Ainsi, lorsqu'un séropositif a un taux de CD4+ supérieur à 350/mm3, il n'est pas nécessaire de commencer un traitement.

• Mais, sous la barre des 200/mm3, il est impératif de commencer un traitement.

• Le nombre de CD4 par rapport au nombre total de lymphocytes est également un critère. Ainsi lorsque les CD4+ représentent moins de 15 % de tous les lymphocytes, un risque d'infection par des maladies opportunistes apparaît

Donc, quand décide-t-on de démarrer un traitement ?

• en cas de primo-infection symptomatique sévère

• en fonction du taux de lyT CD4+

• Détermination du taux de lyT CD4+ par immunophénotypage lymphocytaire :

  • si lyT CD4+ > 15% taux de Ly totaux

  • si lyT CD4+ > 350/mm3

Stratégie de suivi des patients séropositifs pour le VIH :

• LyT CD4+>500/mm3 :

  • bilan virologique tous les 6 moisDétermination de la quantification de l'ARN viral plasmatique

  • Typage lymphocytaire CD4/CD8

• 350<LyT CD4+<500/mm3 : bilan virologique tous les 3-4 mois

  • Détermination de la quantification de l'ARN viral plasmatique

  • Typage lymphocytaire CD4/CD8