Diagnostic virologique
Le diagnostic des infections herpétiques repose principalement sur la mise en évidence du virus par isolement en culture cellulaire ou d'un constituant viral par immunofluorescence ou PCR. Certaines situations imposent un diagnostic virologique d'urgence.
Indications du diagnostic virologique des infections herpétiques
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Herpès labial : NON
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Herpès génital nécessite une confirmation virologique surtout en cas de projet de grossesse
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Prévention de l'herpès néo-natal en cas d'antécédents connus chez la mère
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Toutes les formes graves
Le but du diagnostic est de mettre en évidence le virus, des protéines virales ou du génome viral dans les lésions observées.
Prélèvements
Ils doivent être réalisés le plus tôt possible après l'apparition des signes cliniques.
Les prélèvements doivent contenir des cellules infectées être réalisés stérilement et être acheminés rapidement au laboratoire.
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Liquide vésiculaire prélevé à la seringue : pour isolement viral en culture ou IF
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Écouvillonnage énergique d'une ulcération : idem
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Ponction de liquide céphalo-rachidien : pour recherche du génome viral par PCR
Prévention de l'herpès néo-natal :
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Écouvillonnage vulvaire et du col utérin lors de l’accouchement
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Écouvillonnage de la gorge, du nez, des yeux plus de 48h après la naissance
Ces prélèvements sont réalisés en vue d'un isolement viral en culture cellulaire et/ou d'une IF.
Techniques utilisées pour le diagnostic des infections herpétiques
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Isolement de virus en culture cellulaire
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Recherche d'antigènes viraux par immunofluorescence
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Recherche d'ADN viral par PCR
Isolement de virus en culture
C'est la technique de référence pour rechercher une excrétion asymptomatique. Elle permet aussi de rechercher la présence d'HSV dans des lésions vésiculaires. Après inoculation de l'échantillon sur des cellules, un effet cytopathogène apparaît en 24 à 48h. Cet ECP est commun aux HSV-& et 2, un typage viral est donc nécessaire. Il est réalisé par IF sur les cellules en culture.
|  Effet cytopathogène d'un virus herpes simplexInfo1 |
Recherche d'antigènes viraux par immunofluorescence
Cette technique est utilisée pour :
Cette technique donne des résultats en 2 à 4 heures. Elle est surtout utilisée pour le diagnostic des infections génitales mais aussi pour le diagnostic d'une éruption vésiculaire quelle que soit sa localisation. |  HSV en IFIInfo2 |
Recherche d'ADN viral par PCR
C'est la technique de référence pour le diagnostic de la méningo-encéphalite herpétique à partir de LCR. C'est une méthode parfaitement adaptée au diagnostic d'urgence. Certaines techniques commerciales permettent la détection différenciée HSV-1/2 en une même PCR.
Cette technique peut aussi être utilisée pour le diagnostic chez l'immunodéprimé.
Utilisation des tests diagnostiques
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Diagnostic étiologique d'une infection à HSV
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Encéphalite herpétique
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Recherche d'une excrétion asymptomatique génitale chez femme enceinte
Diagnostic étiologique d'une infection à HSV (génitale par exemple)
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L’isolement viral en culture cellulaire est la technique de référence
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La recherche d'antigènes viraux par IF peut être difficile à interpréter. Elle n'est donc pas utilisée dans ce cadre. L'IFI sert à typer le virus en cas de présence d'ECP.
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La présence du virus au niveau de lésions est fortement évocateur,
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L'excrétion de virus dans la salive lors d'un syndrome encéphalitique ne signe pas une origine herpétique ! C'est pour cela que ça ne sert pas à grand chose d'aller chercher un HSV dans la salive...
Diagnostic d'une méningo-encéphalite herpétique
C'est une urgence biologique (et thérapeutique)
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Il repose sur la détection d’ADN de HSV dans le LCR par PCR.
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En cas de forte suspicion, un examen négatif doit être refait quelques jours après.
Recherche d'une excrétion asymptomatique génitale chez femme enceinte
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L’isolement viral par culture cellulaire reste la référence.
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La recherche de génome viral par PCR peut être une alternative.
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La conduite à tenir chez la femme enceinte en absence de lésion reste sujet à controverse.
