Extraction de métabolites primaires et secondaires d'origine végétale

C1-2.Séparation et caractérisation des alcaloïdes tropaniques par CCM :

 Support :

  • une plaque d'aluminium recouverte de gel de silice F254

 Solvant de migration :

  • ammoniaque concentrée : 3 vol

  • eau distillée : 7 vol

  • acétone : 90 vol

Dépôts :

  • extrait de belladone :10 µL

  • solution témoin hyoscyamine dans l'éthanol (2 mg/mL ) : 5 µL

  • solution témoin de bromhydrate de scopolamine dans l'éthanol (2 mg/mL ) : 5 µL

  • collyre à l'atropine : 5 µL

 Séchage :

  • mettre la plaque à l'étuve à 100°C pendant 10 min pour éliminer l'ammoniaque

 Révélation :

  • examiner dans le visible et en lumière U.V. à 254 puis 365 nm.

  • pulvériser le réactif de Dragendorff (solution d'iodobismuthate de potassium) jusqu'à l'apparition de taches rouge-orangé sur fond jaune. NE PAS CHAUFFER !

  • pulvériser sur la même plaque la solution de nitrite de sodium jusqu'à disparition de la coloration jaune de la plaque. Examiner après 15 minutes : l'hyoscyamine est observée colorée en brun-rouge, la présence d'atropine se détecte par l'apparition d'une coloration bleu-gris.

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