ESSAIS
Chromatographie sur Couche Mince:
Opérer par CCM sur silice aluminium F254.
Solution à examiner (solution b) : dissoudre quelques cristaux de caféine dans quelques gouttes de dichlorométhane.
Solution témoin : solution de caféine à 2,5 g/l.
Déposer 10 l de chaque solution en trait de 5 mm. Sécher les dépôts avant migration.
Solvant de migration (10 ml) : dichlorométhane/ Méthanol : 95 / 5 (V/V)
Migration jusqu'à 1 cm du haut de la plaque.
Sortir et sécher la chromatoplaque à l'air (séchoir à cheveux).
Fondamental :
Avant toute révélation à l'aide de révélateur(s), effectuer une observation de la CCM sous lumière ultraviolette, aux deux longueurs d'ondes 254 nm et 365 nm. Entourer les bandes observées, en utilisant le code suivant :
trait plein = extinction de la fluorescence de l'indicateur à 254 nm, et
trait pointillé = fluorescence des composés excités à 365 nm.
Révélation : À l'aide d'un coton imbibé d'un mélange à volumes égaux d'acide chlorhydrique concentré R et d'éthanol R, tamponner intégralement la CCM. Séchez à 100-105°C pendant 2 min. Tamponner ensuite la solution alcoolique d'iode iodurée R (Réactif de Bouchardat). Examiner à la lumière du jour.
Le chromatogramme obtenu avec la solution à examiner présente une tache principale semblable quant à sa position, sa coloration et ses dimensions à la tache principale du chromatogramme obtenu avec la solution témoin de caféine SCR.
