EXEMPLE D'UN ENSEIGNEMENT PRATIQUE DE PHARMACOGNOSIE : Cas du Café vert - Caféine

IDENTIFICATION de la matière première

Solution A (préparation)

A 5 g de café vert pulvérisé, ajouter 1 ml d'ammoniaque concentré (28%). Homogénéiser le mélange dans un Erlen bouché de 125 ml. Ajouter 50 ml de dichlorométhane R. Agiter énergiquement pendant 15 min.

Filtrer sur papier filtre directement dans un ballon de 250 ml à col rodé. Évaporer le sous pression réduite, jusqu'à siccité.

Préparer un petit filtre papier (chauffé) en le faisant traverser par 10 ml d'eau distillée bouillante qui est jetée.

Dissoudre le résidu en ajoutant dans le ballon, 3 ml d'eau distillée bouillante. Filtrer à chaud sur le filtre chaud dans un ballon à col rodé en verre de 100 ml : ce filtrat constitue la « solution A ». Pour la réaction D, ci-dessous, prélever dès maintenant 1 ml de cette solution dans un tube à essais de 16 ml. Évaporer le reste (2 ml) comme décrit en C).

  • A. Le café vert présente les caractères macroscopiques précédemment décrits.

  • B. Examiné au microscope, le café vert pulvérisé présente les caractères microscopiques précédemment décrits.

  • C. Évaporer à siccité au rotavapor, les 2 ml restants de la solution A. Ajouter 0,25 ml (± 4 gouttes) de solution concentrée de peroxyde d'hydrogène (H2O2) R et 0,25 ml (± 4 gouttes) d'acide chlorhydrique à 10% (± 1 gtte d'HCl conc à 37% + 3 gttes d'H2O distillée).

    Évaporer le mélange à siccité au rotavapor, puis à feu nu (heat-gun). Le résidu se colore en rouge-orangé. Ajouter 0,1ml (4 gttes) d'ammoniaque diluée (10%), le résidu devient rouge-violet (réaction de la murexide : mise en évidence des bases xanthiques).

  • D. A 1 ml de la solution A, ajouter 2 gouttes de solution d'iodure de potassium iodé R (réactif de Bouchardat). Le mélange reste limpide. Ajoutez 2 gouttes d'acide chlorhydrique dilué R (= 1 goutte d'eau+1 goutte d'HCl conc). Il se forme un précipité brun qui se dissout après neutralisation par la solution diluée d'hydroxyde de sodium R (mise en évidence des bases xanthiques).

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