Question 15
Représentons maintenant sur un graphe les résultats obtenus pour les quatre concentrations de substrat, mais cette fois en fonction de la concentration d'enzyme : v0 = f(E)
Question
Est-ce que les représentations sont linéaires quelles que soient les concentrations d'enzyme et de substrat ? Que peut-on en déduire pour la détermination d'une activité enzymatique ?
Eh bien non !
Il faut utiliser des concentrations de S valant 10 à 100 fois la Km.
Complément :
La représentation est linéaire sur toute la gamme de concentrations de E pour les concentrations S3 et S4 (courbes violette et bleue), qui permettent de s'approcher de la Vmax. Par contre, la droite correspondant à S2 (courbe rouge) s'infléchit pour la plus forte concentration de E ; la linéarité analytique est réduite au domaine de mesure allant à 3 nkatal.L-1. Quant à S1 (courbe brune), il ne permet pas d'obtenir une réponse linéaire sur un domaine intéressant puisqu'il se limite à 2 nkatal.L-1, soit seulement deux fois la valeur du premier point. Il faut préférer l'emploi de S4 pour assurer le plus grand domaine de mesure, donc on doit travailler dans des conditions de v0 proches de Vmax (ce que l'on obtient avec S = 10-100 Km).